一,、沉淀法
沉淀法也稱溶解度法,。其純化生命大分子物質(zhì)的基本原理是根據(jù)各種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)差異性來改變?nèi)芤旱哪承?/span>性質(zhì),進(jìn)而導(dǎo)致有效成分的溶解度發(fā)生變化。
1、鹽析法
鹽析法的根據(jù)是蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中,,溶解度會隨鹽濃度的增高而上升,但當(dāng)鹽濃度增高到一定數(shù)值時(shí),,使水活度降低,,進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和,水化膜逐漸被破壞,,最終引起蛋白質(zhì)分子間互相凝聚并從溶液中析出,。
2、有機(jī)溶劑沉淀法
有機(jī)溶劑能降低蛋白質(zhì)溶解度的原因有二:其一,、與鹽溶液一樣具有脫水作用,;其二、有機(jī)溶劑的介電常數(shù)比水小,,導(dǎo)致溶劑的極性減小。
3,、蛋白質(zhì)沉淀劑
蛋白質(zhì)沉淀劑僅對一類或一種蛋白質(zhì)沉淀起作用,,常見的有堿性蛋白質(zhì)、凝集素和重金屬等,。
4,、聚乙二醇沉淀作用
聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀作用。
5,、選擇性沉淀法
根據(jù)各種蛋白質(zhì)在不同物理化學(xué)因子作用下穩(wěn)定性不同的特點(diǎn),,用適當(dāng)?shù)倪x擇性沉淀法,即可使雜蛋白變性沉淀,,而欲分離的有效成分則存在于溶液中,,從而達(dá)到純化有效成分的目的。